【产品概述】
本产品为浓缩型免冰浴快速转膜缓冲液,是一种安全无害的用于 Western Blot 时湿法快速转膜的缓冲液,转膜过程中产热少,无需内外置冰浴,400mA 恒流 15-30 min 就能高效快速地将小分子量和大分子量蛋白同时从凝胶转移到印迹膜上,适用于不同缓冲体系的聚丙烯酰胺凝胶,转膜效果好。
【产品特色】
1. 安全无毒害:本产品无需使用有毒的甲醇等试剂,不含有毒有害组分。
2. 转膜快速、无需冰浴:使用快速转膜缓冲液时,在400 mA恒流转膜15-30 min即可将聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白转移至PVDF膜或硝酸纤维膜(NC膜)等印迹膜上,并且产热较传统转膜缓冲液更低。
3. 适用于不同缓冲体系的聚丙烯酰胺凝胶快速转膜。
4. 转膜缓冲液的转膜效果与竞品一致或更优。
【使用方法】
1. 取10× 免冰浴快速转膜缓冲液 100 mL,加入 600 mL 去离子水、蒸馏水或超纯水混匀后,继续加入 100mL 无水乙醇混匀,最后再补充去离子水、蒸馏水或超纯水定容至 1L,混匀后即得到 1× 工作液;
2. 做好转印所需的三明治结构,从负极(黑色面)到正极(红色面)顺序为海绵、滤纸、凝胶、印迹膜、滤纸、海绵,然后转移至转印槽中,加入免冰浴快速转膜缓冲液,设定恒流 400 mA,转膜时间设置 15-30min(此条件针对1.0 mm厚的凝胶,如凝胶厚度为 0.75mm,适当减少转膜时间;如凝胶厚度为 1.5 mm,适当延长转膜时间)完成蛋白转膜。
【注意事项】
1. 工作液配制后请尽快使用。
2. 本产品适用于 Tris-glycine、Bis-Tris 等体系蛋白凝胶的湿法转膜。
3. PVDF 膜使用前需用无水乙醇浸润 30 s 左右。
4. 转印电流建议设定恒流 400 mA,一般 20 kDa 以下蛋白建议转膜 5-15 min;20-150 kDa 蛋白建议转膜 15-25min;150 kDa 以上蛋白建议转膜 25-30 min。
5. 30 min 内的转膜无需冰浴,超过 30 min 的转膜建议冰浴。
6. 由于转膜的电源品牌和型号的不同,一方面最高电流差异较大,另一方面功率也会有加大差别;部分电源设定恒流为 400 mA 时,会超过最大功率出现过载保护,此时需适当调低电流,或者选用功率更大的电源。
产品中心
· 抗体
· 蛋白提取与定量
· 蛋白电泳
· 蛋白免疫印迹
· 蛋白表达纯化与分离
· 蛋白质
· 核酸相关实验
· 细胞培养
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