无血清细胞冻存液 #RD0501

无血清细胞冻存液，通用于各种动物细胞株(肿瘤细胞和常规细胞)，冻存细胞可在-80℃长期保存。配方成分明确，不含动物来源性蛋白，不含血清，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全。该冻存液含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分，提高细胞存活率和活力，亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。

产品特点

※ 即用型细胞冻存液

※ 直接冻存于-80°C冰箱，长期保存，不需要程序性降温

※ 高安全性，病毒、病菌和支原体等污染可能性低

※ 细胞存活率和活力高，批次性差异小

使用方法

1.完成转膜后，将膜移入到平皿或者其他适合的容器中（可以不洗涤膜）。

2.根据膜的大小，加入适量体积的封闭液，需完全浸没覆盖膜，对于 7.5x 8cm 的膜推荐使用量 5-10ml。

3.置于水平摇床上，室温条件下振荡孵育 10 分钟。

4.取出封闭完成的膜，用洗涤液冲洗蛋白膜 2-3 次，即可用于一抗孵育等后续 western blot 实验。

细胞冻存步骤

1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。
2. 根据培养细胞的密度和冻存管大小确定所需冻存细胞数。
3. 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中，1000rmp，5分钟离心收集培养细胞沉淀，彻底弃去离心管中的上清液。
4. 加入适量的细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度约为 5x10⁵-1x10⁷/ml。轻柔地混匀细胞，制成细胞混合液。
5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中，建议每管1ml或5ml。
6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中，可长期冷冻保存。
7. 如果想液氮中长期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天时间，方可移至液氮罐中保存。

冻存细胞复苏步骤

1. 从冰箱中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴槽中快速解冻。
2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即加入1ml 细胞培养基于冷冻管中与细胞混合，将其中的混合液移至含有约 5ml 该细胞培养基的离心管中，1000rmp，5 分钟离心收集冻存细胞沉淀，移去上清液(操作时小心，切勿将细胞沉淀移去)。
3. 加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓加入到细胞沉淀，轻柔地混匀，将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。
4. 镜检细胞后，可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。

质量保障

本品经过严格的内毒素、渗透压、病原体和 H 检验，确保产品不含病菌、病毒以及支原体等。用于常规的细胞冻存，-80℃可长期保存，细胞存活率在90-98%。

注意事项

1. 在冻存细胞分装后，应减少在外存放时间，尽快移入到-80℃超低温冰箱。

     2.对于干细胞 (ES细胞)、原代细胞等冻存时，我们建议用户在使用前，事先对所冻存的胞进行至少为期 1 周的该产品试验性细胞冷冻保存培养，确认性能后再进行正式冻存。

3. 含有10%DMSO，部分对DMSO敏感的细胞，建议对其进行至少 1 周的本产品试验性的细胞冻存培养，确认性能后再正式冻存。

     4.对于没有保种的新的细胞类型，使用时，我们建议同时用含有血清的冻存液同时冻存，确保细胞冻存不出现意外全部死亡等现象发生。

免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。